沛歐凱氏定氮儀測定蛋黃卵磷脂的氮含量
1 前言
蛋黃卵磷脂是一種磷脂混合物，主要成分是磷脂酰膽堿（PC），因此其生理作用也以PC的功能為主。蛋黃卵磷脂含氮（N）量應為1.75%～1.95%。蛋黃卵磷脂對熱非常敏感，在酸性、堿性和酯酶作用下易水解。對蛋白質(zhì)、蛋黃過敏者禁用。用于乳化劑、脂質(zhì)體膜材、食品領域等[1]。據(jù)大多數(shù)報告，PC能抑制血清甘油三酯和總膽固醇，而提高高密度脂蛋白。本實驗參照《中國藥典》2020版規(guī)定蛋黃卵磷脂用0704氮測定方法進行測定[2]。
2 樣品信息
原料：雞蛋黃或雞蛋粉，樣品名稱：蛋黃卵磷脂
3 儀器與試劑
3.1 儀器
SKD-1000全自動凱氏定氮儀，SKD-20S2紅外石英消化爐，分析天平等
3.2 試劑
硫酸（分析純），20g/L 硼酸溶液，溴甲酚綠-甲基紅混合指示劑，400g/L 氫氧化鈉溶液，硫酸銅硫酸鉀混合催化劑，0.1mol/L 硫酸標準滴定液。
4 實驗方法
4.1 取樣
取0.1g（**至0.1mg）左右的樣品，加硫酸銅硫酸鉀混合催化劑5g，再加濃硫酸10ml。
空白放相同的催化劑和濃硫酸。
4.2 消化前處理
將加完樣品和試劑的消化管放置于消化爐上，蓋好排廢裝置，設定紅外石英消化爐參數(shù)如表 1 所示：
表1 消化爐參數(shù)設置
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程序段 |
溫度℃ |
時間min |
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程序段1 |
180 |
5 |
|
程序段2 |
250 |
5 |
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程序段3 |
300 |
10 |
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程序段4 |
350 |
10 |
|
程序段5 |
400 |
90 |
4.3 測試
消解完成后，待消化管冷卻至室溫后取下備用。檢查定氮儀各試劑是否充足，同時做儀器空白，待儀器空白穩(wěn)定后，可將消解好的樣品上機測試。定氮儀參數(shù)設置如表 2 所示：
表2 定氮儀參數(shù)設置
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稀釋液 |
堿 |
蒸餾時間 |
蒸餾功率 |
蛋白系數(shù) |
標準酸 |
標準酸濃度 |
樣品重量 |
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40ml |
45ml |
6分鐘 |
100% |
1 |
鹽酸 |
0.05468mol/L |
g |
5 結(jié)果與討論
5.1 實驗結(jié)果
實驗選取的蛋黃軟磷脂樣品經(jīng)消解、蒸餾、滴定，得到實驗結(jié)果如表 3 所示：
表3 實驗結(jié)果
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樣品名稱 |
測量次數(shù) |
重量g |
測量值% |
平均值% |
示值誤差（≤1%） |
測量重復性RSD（≤0.5%） |
標準值% |
|
硫酸銨 |
1 |
0.05694 |
21.13209 |
21.1053 |
0.2868 |
0.1461 |
21.19%±1% |
|
2 |
0.05674 |
21.07156 |
|||||
|
3 |
0.05371 |
21.11212 |
|||||
|
蛋黃軟磷脂 |
4 |
0.41036 |
1.79718 |
1.80395 |
0.5853 |
0.3258 |
1.75-1.95 |
|
5 |
0.17552 |
1.80693 |
|||||
|
6 |
0.22214 |
1.80774 |
5.2 實驗結(jié)論
本次測試的蛋黃軟磷脂氮含量為1.80395%，RSD值為0.3258%，測試結(jié)果低于凱氏定氮儀國標要求RSD≤0.5%。示值誤差為0.5853%，小于凱氏定氮儀國標要求≤1%，表明該蛋黃軟磷脂樣品氮含量合格[ PAGEREF _Ref2868 \h 3]。
6 參考文獻
[1] 關(guān)志宇．**制劑輔料與包裝材料[J].中國醫(yī)藥科技出版社，2017(01)：21.
[2] 《中國藥典》（2020版）:通則0704.
[3] GBT 33862-2017 全(半)自動凱氏定氮儀[S].
